Make your own free website on Tripod.com

mainlogo.JPG

Genes and male subfertility - 2

Home
Chapters
Male Anatomy
- 1.2 -
- 1.3 -
- 1.4 -
Statistics
Sperm Analysis
- 3.2 -
Genes' Role
- 4.2 -
- 4.3 -
Kleinefelter's Syndrome
Syndromes & Diseases
- 6.2 -
- 6.3 -
- 6.4 -
Varicoceles & other factors
- 7.2 -
- 7.3 -
- 7.4 -
- 7.5 -
- 7.6 -
Cancer's Role
- 8.2 -
Idiopathic subfertility
- 9.2 -
Treatment - Therapy
- 10.2 -
News
News - 2
Video Room
Photo Album Page
Mailbag
Contact Us
Make your comment!

ch4_04.JPG
Autosomal genes with role in gametogenesis

Πρωτεΐνες με επίδραση στην σύναψη των χρωμοσωμάτων

Γονίδια και άλλων τύπων έχουν συμπεριληφθεί στην διαδικασία που είναι απαραίτητη για την σπερματογένεση στα ποντίκια. Πρόκληση εσκεμμένης βλάβης στην πρωτεΐνη θερμικού σοκ Hsp70-2 η οποία εκφράζεται ειδικά σε μειωτικά σπερματοκύτταρα , οδηγεί σε αποτυχία της μείωσης και ανδρική υπογονιμότητα, πιθανότατα επιδρώντας στο σχηματισμό του συμπλέγματος των χρωμοσωμάτων κατά την διάρκεια της σύναψης. Μία δεύτερη  πρωτεΐνη θερμικού σοκ η Hsc70tp εκφράζεται ειδικά στις στρογγυλές σπερματίδες.

Δύο από τα ποιο σημαντικά γονίδια που συμμετέχουν στην διαδικασία της μείωσης είναι τα γονίδια επιδιόρθωσης αταίριαστων βάσεων  Pms2 και Mlh1. Αυτά τα γονίδια διερευνώνται εντόνως εξαιτίας της σχέσης τους με την εμφάνιση ορισμένων μορφών κακοήθειας. Αλλά όταν τα Pms2 και Mlh1 λείπουν ομόζυγα τότε επιδρούν στο ζευγάρωμα κατά την διάρκεια της μείωσης. Στην περίπτωση έλλειψης  του  Mlh1 έχουμε την εμφάνιση ανδρικής και γυναικείας υπογονιμότητας με τα αρσενικά να μην παράγουν σπερματίδες και τα θηλυκά  να παράγουν μειωμένο αριθμό ωοκυττάρων . Ομοζυγώτες στην έλλειψη  Pms2 είναι γόνιμοι ως θηλυκά και στείροι ως αρσενικά.

Άλλες πρωτεΐνες με λειτουργίες στη μείωση είναι οι ATM , ATR. Το γονίδιο της ATM αρχικά απομονώθηκε ως το γονίδιο που μεταλλάσσεται στη ataxia-telangiectasia. Συμμετέχει στον μεταβολισμό του   DNA. Είναι πολύ στενά συνδεδεμένο με το γονίδιο ATR το οποίο είναι το αντίστοιχο γονίδιο για το RAD3 που εντοπίζεται στην μαγιά . Αυτό το γονίδιο είναι απαραίτητο για την διεκπεραίωση λειτουργιών που πυροδοτούνται σε βλάβες του DNA. Έλλειψη του ATM στα ποντίκια οδηγεί σε υπογονιμότητα και θραυσματοποίηση χρωμοσωμάτων κατά την διάρκεια της μείωσης καθώς και στην εμφάνιση άλλων χαρακτηριστικών που σχετίζονται με την παθολογία της  ataxia-telangiectasia.

 

Άλλα γονίδια που πιθανόν να μετέχουν στην διαδικασία της σπερματογένεσης.

Ένα γονίδιο το οποίο βρέθηκε πρόσφατα και πιθανολογείται ότι επηρεάζει την διαδικασία της σπερματογένεσης είναι το γονίδιο POLG . Αυτό το γονίδιο βρέθηκε σε σχηματισμούς του κυττάρου  που αποκαλούνται μιτοχόνδρια . Μία ομάδα της οποίας ηγούνται οι Dr. Howard και T. Jacobs στο πανεπιστήμιο Tampere της Φινλανδίας ανακάλυψαν ότι περίπου το 9% μίας ομάδας από στείρους άνδρες είχαν μία διαφορετική μορφή ενός γονιδίου που ονομάζεται POLG από ότι φυσιολογικοί άνδρες . Αυτή η  ερευνητική ομάδα συμπέραναν ότι τουλάχιστον στους ευρωπαίους άνδρες για τους οποίους δεν υπάρχει κάποιος εμφανείς λόγος υπογονημότητας το γονίδιο POLG μπορεί να θεωρηθεί συνένοχο. Μία άλλη έρευνα που διεξήχθη στο St. Jude Children's Research Hospital  και δημοσιεύθηκε στο Molecular and Cellular Biology δείχνει ότι ποντίκια τα οποία  δεν έχουν τα γονίδια Ink4d και Ink4c θα παράγουν μικρή ποσότητα σπερματίδων με μειωμένη κινητικότητα και βιωσιμότητα. Και τα δύο γονίδια ρυθμίζουν μιτωτικές και μειωτικές διαιρέσεις που χαρακτηρίζουν την διαδικασία της σπερματογένεσης. Απουσία αυτών των δύο γονιδίων η παραγωγή των σπερματοκύτταρων καθυστερείται . Αυτή η καθυστέρηση σχετίζεται με την μεγάλη συχνότητα κυτταρικού θανάτου. Τα ανθρώπινα αντίστοιχα  Ink4d και Ink4c μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως γενετικοί δείκτες για ορισμένης μορφής ανδρικής υπογονιμότητας. Τέλος ένα άλλο γονίδιο το οποίο προκαλεί κρυψορχιδία και κατά συνέπεια υπογονημότητα. Το γονίδιο αυτό απομονώθηκε και είναι το Insl3 το οποίο εκφράζεται στα κύτταρα Leydig. Ποντίκια με έλλειψη στο Insl3 εμφανίζουν αμφίπλευρη κρυψορχία.

ΕΡΕΥΝΑ ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΞΕΤΑΣΗ  ΜΙΚΡΟΕΛΛΕΙΨΕΩΝ ΣΤΟΝ ΑΖΩΟΣΠΕΡΜΙΚΟ ΠΑΡΑΓΟΝΤΑ

Σκοπός :  Ο σκοπός της έρευνας είναι η εξέταση των προτύπων των μικροελλείψεων του DNA που εντοπίζονται στην περιοχή του αζωοσπερμικού παράγοντα του Υ χρωμοσώματος σε ασθενείς με ιδιοπαθή αζωοσπερμία.

 

Υλικά και μέθοδοι

Μη γόνιμοι άνδρες συγκεντρώθηκαν από την κλινική υπογονημότητας του Εθνικού Πανεπιστημιακού Νοσοκομείου της Σεούλ. Όλοι οι ασθενείς υπεβλήθησαν σε αναλύσεις σπέρματος. Επιπρόσθετα αποκτήθηκε το πλήρες ιστορικό του κάθε ασθενούς και πραγματοποιήθηκαν ιατρικές εξετάσεις. Η αζωοσπερμία πιστοποιήθηκε με δύο διαφορετικές αναλύσεις , κάθε μία πραγματοποιήθηκε μετά από τριήμερη περίοδο σεξουαλικής αποχής που χωρίζονταν από ένα διάστημα 3εβδομάδων, σύμφωνα με τις οδηγίες της παγκόσμιας οργάνωσης υγείας.

Χρωμοσωμικές αναλύσεις πραγματοποιήθηκαν σε καλλιέργειες λεμφοκυττάρων με την τεχνική GTG. Επίσης μετρήθηκαν τα επίπεδα  τεστοστερόνης , FSH, και LH .Ακόμη διεξήχθησαν βιοψίες όρχεων με την συγκατάθεση των ασθενών.

Σύνδρομο μόνο κυττάρων Sertoli (SCOS) διαγιγνώσκεται μόνο όταν όλο το υλικό που αποκτήθηκε και από τους δύο όρχεις περιέχει μόνο κύτταρα Sertoli. Σπερματογονική διακοπή διαγιγνώσκεται  όταν τα σωληνοειδή  δεν περιέχουν  σπερματοζωάρια αλλά μόνο αναπτυσσόμενα σπερματοκύτταρα και σπερματίδες. Χρησιμοποιώντας αυτά τα κριτήρια επιλέξαμε τους ασθενείς που έπασχαν από ιδιοπαθή αζωοσπερμία και είχαν αμφίπλευρο SCOS και σπερματογονική διακοπή και των οποίων οι καρυότυποι ήταν φυσιολογικοί.

 

Αλληλουχία περιοχων προσκόλλησης

(Sequence-Tagged –Sites STS)

Μία ομάδα από 37 Υ-καθοριστικά STSs τα οποία εκτείνονται από στην περιοχή της ευχρωματίνης στο σκέλος Υq και SRY δοκιμάστηκαν σε κάθε ασθενή. Όλα τα   STSs έχουν περιγραφεί και χρησιμοποιήσαμε την σειρά και την εντόπιση με βάση τις προτάσεις των Vollrath et al.  και  Foote et al. όπως αναφέρονται από τους Reijo et al. Έτσι δοκιμάστηκαν 8 STSs από το διάστημα απάλειψης 5, 28 STSs από το διάστημα απάλειψης 6, συμπεριλαμβανομένου 4 από το 6A , 3 από το 6B , 4 από το  6C , 9 από το 6 D,5 από το  6E και 3 από το 6F. Μία ομάδα STSs για το SRY το οποίο εντοπίζεται στο Υq χρησιμοποιήθηκε ως  εκκινητής ελέγχου.

ch4_05.JPG
Sequence-tagged sites (STSs) in PCR

Ανάλυση ελλείψεων μέσω της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης

Γενωμικό  DNA  αποκτήθηκε από περιφερικά κύτταρα του αίματος και 9 δοκιμασίες PCR  ενισχύθηκαν κάθε μία περιέχοντας 3-5 ζεύγη εκκινητών . PCR ανάλυση πραγματοποιήθηκε με 100 ng           γενωμικού DNA σε τελικό όγκο 25μl συμπεριλαμβάνοντας και ρυθμιστικό διάλυμα.Τα προϊόντα της PCR  χωρίστηκαν σε διάλυμα 2% αγαρόζης με  ηλεκτροφόρηση. Απάλειψη ενός συγκεκριμένου γενετικού τόπου στο Υq11 προκύπτει από την αδυναμία ενίσχυσης από δύο ανεξάρτητες  PCR .

 

Αποτελέσματα

Η ιστολογική ανάλυση των όρχεων έδειξε ότι 36 άτομα έπασχαν από το σύνδρομο Sertoli ενώ 4 εμφάνιζαν διακοπή της σπερματογένεσης . Μικροελλείψεις του Υ χρωμοσώματος βρέθηκαν σε 8(20%) από τους ασθενείς με αζωοσπερμία . Και οι 8 ασθενείς είχαν μικροελλείψεις  στην υποπεριοχή AZFc  . Ασθενείς με το σύνδρομο Sertoli εμφάνισαν μικροελλείψεις σε περιοχές του γονιδίου DAZ (7στους 8).  Σε 5 ασθενείς εμφανίστηκαν μικροελλείψεις στην περιοχή AZFb όπου βρίσκεται το γονίδιο RBM .

7στις 8 μικροελλείψεις εντοπίζονται στην περιοχή του γονιδίου DAZ ()

Σε τρεις περιπτώσεις (ασθενείς 2,3,4) οι μικροελλείψεις εντοπίζονται στην υποπεριοχή  AZFb. ().

Σε επτά ασθενείς μικρές ελλείψεις βρίσκονται διάσπαρτες από περιοχές που αντιστοιχούν στο μέχρι το στην υποπεριοχή AZFc  .

Σε τέσσερις ασθενείς(2,6,7,8)εντοπίστηκε μία μεγάλη έλλειψη στην περιοχή του γονιδίου DAZ στο σημείο

Σε ασθενείς με σύνδρομο Sertoli  (1-6) οι  μικροελλείψεις ήταν παρούσες στις υποπεριοχές AZFc AZFb.Στους ασθενείς με διακοπή σπερματογένεσης οι μικροελλείψεις περιορίστηκαν  μόνο στην περιοχή AZFc.Δεν εμφανίστηκαν ελλείψεις στην υποπεριοχή AZFa.

ch4_06.JPG
Results

Red Hand Pointing Left
Go back one step

Red Hand Pointing Right
Read more...

Horizontal Divider 26

ΜΗΧΑΝΗ ΑΝΑΖΗΤΗΣΗΣ ΣΤΟ WEB - ΜΗΧΑΝΗ ΜΕΤΑΦΡΑΣΗΣ ΑΠΟ ΕΛΛΗΝΙΚΑ ΣΕ ΑΛΛΕΣ ΓΛΩΣΣΕΣ

Web

InterTran (www.tranexp.com)
InterTran (www.tranexp.com)

Please MOVE AND HOLD your MOUSE CURSOR over any WORD in the translated web page in order to see a pop-up window with ALTERNATIVE TRANSLATIONS. Translations provided by: www.tranexp.com

worldnotobaccoday2006.gif

ΕΠΙΣΚΕΠΤΕΣ ΜΕΧΡΙ ΣΗΜΕΡΑ

Copyright Kostas Roditis 2004. All rights reserved.